Окраска гематоксилином и эозином

Материал из Википедии — свободной энциклопедии
Перейти к: навигация, поиск
Гистологический образец лёгочной ткани человека, окрашенный гематоксилин-эозином.

Окраска гематоксилином и эозином (окраска гематоксилин-эозином) — один из самых распространённых методов окраски в гистологии. Широко используется в медицинской диагностике, в частности в онкологии для окраски удаленной или полученной при биопсии ткани.

Окраска включает использование основного красителя гематоксилина, окрашивающего базофильные клеточные структуры ярко-синим цветом, и спиртового кислого красителя эозина Y, окрашивающего эозинофильные структуры клетки красно-розовым цветом. Базофильные структуры, как правило, это те, которые содержат нуклеиновые кислоты (ДНК и РНК): клеточное ядро, рибосомы и РНК-богатые участки цитоплазмы. Эозинофильные структуры содержат внутри- и внеклеточные белки, например, тельца Леви. Цитоплазма является эозинофильной средой. Эритроциты всегда прокрашиваются ярко-красным цветом.

Техника окраски гематоксилин-эозином[править | править вики-текст]

  1. Удаляют парафин из срезов в орто-ксилоле или толуоле, проводят по спиртам нисходящей концентрации и доводят до воды (две порции ксилола или толуола – 3-5 минут, 96° этанол – 3 минуты, 80° этанол – 3 минуты, 70° этанол – 3 минуты, дистиллированная вода – 5 минут).
  2. Окрашивают гематоксилином 7-10 минут (в зависимости от зрелости красителя).
  3. Промывают в дистиллированной воде – 5 минут.
  4. Дифференцируют в 1% соляной кислоты на 70° этаноле до побурения срезов.
  5. Промывают дистиллированной водой, а затем слабым (0,5 %) раствором аммиака до посинения срезов.
  6. Окрашивают водным раствором эозина 0,5-1 минуту (в зависимости от желаемой окраски).
  7. Промывают в трех порциях дистиллированной воды для удаления избытка эозина.
  8. Удаляют воду из срезов в одной порции 70° этанола, двух порциях 96° этанола. Экспозиция в каждой порции спирта – 2 минуты.
  9. Просветляют срезы в двух порциях карбол-ксилола (смесь расплавленного фенола и ксилола либо толуола в соотношении 1:4 или 1:5) – 1 минута.
  10. Производят окончательное обезвоживание срезов в двух порциях ксилола или толуола. Прибывание срезов 2 минуты.
  11. Заключить срезы в канадский бальзам или синтетическую среду для заключения гистологических срезов.

Некоторые структуры плохо прокрашиваются гематоксилином и эозином (как правило гидрофобные) и требуют иных методов окраски. Например, участки клеток, богатые липидами и миелином, остаются неокрашенными: адипоциты, миелиновая оболочка аксонов нейронов, мембрана аппарата Гольджи и др.

См. также[править | править вики-текст]

Ссылки[править | править вики-текст]