Трис-ацетатный буфер

Материал из Википедии — свободной энциклопедии
Перейти к: навигация, поиск

Трис-ацетатный буфер (TAE) — буферный раствор, содержащий трис, ускусную кислоту и ЭДТА (этилендиаминтетрауксусную кислоту).

Используется в молекулярной биологии в основном для гель-электрофореза при разделнии фрагментов нуклеиновых кислот.[1] Имеет меньшую буферную ёмкость, чем TBE, в связи с чем быстрее истощается, однако, линейные двухцепочечный фрагменты ДНК перемещаются в TAE быстрее.

Приготовление 50-кратного TAE буфера[2]
Компонент Количество для приготовления 100 мл раствора
Трис 24,22 г
ЭДТА 1,862 г
Уксусная кислота (ледяная) 8,96 мл
H2O (деионизированная) 73,3 г

Для получения рабочей концентрации 50-кратный буфер разводят в дистиллированной воде в соотношении 1:50.

Применение[править | править вики-текст]

TAE широко используется при проведениея гель-электрофореза (в качестве форезного буфера и компонента агарозного геля) для очистки ДНК, анализа ДНК-продуктов, полученных в результате ПЦР, разделения фрагментов ДНК.[3]

См. также[править | править вики-текст]

Примечания[править | править вики-текст]

  1. Ogden, R.C., and Adams, D.A., (1987) Electrophoresis in agarose and acrylamide gels. Methods Enzymol., 152:, 61-87.
  2. Расчёт TAE буфера на molbiol.ru. Архивировано из первоисточника 13 декабря 2012.
  3. Sambrook, Fritsch, and Maniatis (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, volume 3, apendices B.11 and B.23 ISBN 0-87969-309-6