Иммуно-ПЦР: различия между версиями
← Новая страница: «'''Иммуно-ПЦР''' это группа сверхчувствительных методов для выявления антигенов…» |
(нет различий)
|
Версия от 19:16, 9 марта 2016
Иммуно-ПЦР это группа сверхчувствительных методов для выявления антигенов, которые сочетают специфичность распознавания антигенов антителами и чувствительность ПЦР[1].
В основе метода лежит использование моноклональных антител соединенных с ДНК. Антитело связывается с антигеном, после чего с помощью реакции амплификации полимеразной цепной реакции проводится экспоненциальное усиление сигнала.
Технология была создана ещё в 1992 году[2] и с тех пор многократно модифицировалась. Так, например, антитела могут быть заменены аптамерами[3]. Кроме того в отличие от таких методов анализа как ИФА (Иммуноферментный анализ, англ. enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) и радиоиммунный анализ Иммуно-ПЦР позволил в ходе одного опыта определять сразу большое число различных антигенов, благодаря тому что после связывания антител с антигенами эти антитела легко могут быть идентифицированы по уникальным олигонуклеотидным последовательностям ДНК присоединенным к антителам[4].
Ещё одно важное преимущество метода Иммуно-ПЦР заключается в том, что технология не требует работы с опасным радиоактивным материалом как в радиоиммунном анализе, не требует сложного или дорогостоящего оборудования и вместе с тем она достигает высочайшей чувствительности, что позволяет рекомендовать ее онкологам для ранней диагностики предраковых состояний[5]. Так, одна из разновидностей Иммуно-ПЦР, называемый Агглютинационный-ПЦР (ADAP), позволяет обнаружить от зепто- (10−21) до атто- (10−18) молей антител в 2 микролитрах образца. Что даёт возможность выявлять, например, аутоантитела анти-тиреоглобулина из плазмы крови человека с 1000-кратным увеличением чувствительности по сравнению с используемым на сегодня методом радиоиммуноанализа[6] [7].
Требуемое для освоения этих методов оборудование подобное SlipChip[8] можно изготовить даже в условиях кустарного производства, а для регистрации и оценки результатов можно использовать даже сотовый телефон со встроенной фотокамерой[9]. Поэтому технологию можно будет внедрять даже в сельских стационарах.
 | Это заготовка статьи по медицине. Помогите Википедии, дополнив её. |
- ↑ Chang, L., Li, J., & Wang, L. (2016). Immuno-PCR: An Ultrasensitive Immunoassay for Biomolecular Detection. Analytica Chimica Acta. 910, 12–24 doi:10.1016/j.aca.2015.12.039
- ↑ Sano, T., Smith, C. L., & Cantor, C. R. (1992). Immuno-PCR: very sensitive antigen detection by means of specific antibody-DNA conjugates. Science, 258(5079), 120-122. PMID 1439758
- ↑ Pinto, A., Polo, P. N., Rubio, M. J., Svobodova, M., Lerga, T. M., & O’Sullivan, C. K. (2016). Apta-PCR. Nucleic Acid Aptamers: Selection, Characterization, and Application, 1380, 171-177 doi:10.1007/978-1-4939-3197-2_14
- ↑ Gong, H., Holcomb, I., Ooi, A., Wang, X., Majonis, D., Unger, M. A., & Ramakrishnan, R. (2015). A Simple Method to Prepare Oligonucleotide-Conjugated Antibodies and Its Application in Multiplex Protein Detection in Single Cells. Bioconjugate Chem., 27(1), 217–225 doi:10.1021/acs.bioconjchem.5b00613
- ↑ doi:10.1016/j.mcp.2016.01.010
- ↑ Cheng-ting Tsai, Peter V. Robinson, Carole A. Spencer, Carolyn R. Bertozzi.(2016). Ultrasensitive Antibody Detection by Agglutination-PCR (ADAP). ACS Central Science,; doi:10.1021/acscentsci.5b00340
- ↑ Toward diagnosing diseases such as cancer in their earliest stages. ScienceDaily, 2 March 2016
- ↑ Shen, F., Du, W., Kreutz, J. E., Fok, A., & Ismagilov, R. F. (2010). Digital PCR on a SlipChip. Lab on a Chip, 10(20), 2666-2672. doi:10.1039/c004521g PMC 2948063
- ↑ Jesus Rodriguez-Manzano, Mikhail A. Karymov, Stefano Begolo, David A. Selck, Dmitriy V. Zhukov, Erik Jue, Rustem F. Ismagilov (2016). Reading Out Single-Molecule Digital RNA and DNA Isothermal Amplification in Nanoliter Volumes with Unmodified Camera Phones. ACS Nano; doi:10.1021/acsnano.5b0733